隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，醫(yī)學(xué)技術(shù)也在不斷提高。幾年前的冰凍事件照亮了世界。事實證明，不僅食物，而且人體都可以被冷凍和保存。如果你想達(dá)到這樣的目標(biāo)，那么你需要細(xì)胞冷卻劑。如何配置這種東西？現(xiàn)在讓我們詳細(xì)了解一下細(xì)胞冷凍保存液的配方。
(一)細(xì)胞凍存
1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;
2. 取對數(shù)生長期的細(xì)胞，去除舊培養(yǎng)液，用PBS清洗。
3. 去除PBS，加入適量胰蛋白酶(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長的細(xì)胞消化下來;
4. 離心1000rpm，5min;
5. 去除胰蛋白酶，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，計數(shù)，調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的最終密度為5×106/ml～1×107/ml;
6. 將細(xì)胞分裝入凍存管中，每管1～1.5 ml;
7. 在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱，凍存時間及操作者;
8. 凍存：標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序為降溫速率-1～-2℃/min;當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時，可增至-5℃～-10℃/min;到-100℃時，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細(xì)胞的凍存管放入-20℃冰箱2h，然后放入-70℃冰箱中過夜，取出凍存管，移入液氮容器內(nèi)。
(二) 細(xì)胞復(fù)蘇
1. 從液氮容器中取出凍存管，直接浸入37℃溫水中，并不時搖動令其盡快融化。
2. 從37℃水浴中取出凍存管，打開蓋子，用吸管吸出細(xì)胞懸液，加到離心管并滴加10倍以上培養(yǎng)液，混勻;
3. 離心， 1000rpm，5min;
4. 棄去上清液，加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，計數(shù)，調(diào)整細(xì)胞密度，接種培養(yǎng)瓶，37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);
5. 次日更換一次培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。
注意事項
1、從增殖期到形成致密的單層細(xì)胞以前的培養(yǎng)細(xì)胞都可以用于凍存，但最好為對數(shù)生長期細(xì)胞。在凍存前一天最好換一次培養(yǎng)液;
2、將凍存管放入液氮容器或從中取出時，要做好防護(hù)工作，以免凍傷;
3、凍存和復(fù)蘇最好用新配制的培養(yǎng)液。
魚非常美味。它可以補(bǔ)充人體高蛋白和改善視力。這對人體有很大好處。吃魚時，一定要小心魚骨，以免魚骨粘在喉嚨上，影響健康。如果魚骨不小心粘在喉嚨上，感覺特別不舒服，此時不要擔(dān)心。這里有一些嘗試的...
維生素E牛奶富含維生素E和其他營養(yǎng)成分。具有深層護(hù)膚效果和良好的保濕效果。它能滋潤皮膚，防止皮膚皺紋下垂，延緩衰老。年輕10歲不是夢想。它不油膩。對于想要白皙皮膚的漂亮女孩來說，它可以用來美...
據(jù)信，許多人平時都接觸過袋裝豆。袋裝豆的主要作用是去除體內(nèi)的水分，因為袋裝豆和豆袋是用來做湯的。它們不僅味道鮮美，還能幫助我們?nèi)コ鋬龊蟮臒崃亢退帧Ｍ瑫r，它們也能保證病人的身體健康。由于...
普洱茶具有疏肝理氣、健脾開胃的功效。還可以治療食物堆積和消化不良。它更適合保健。因為許多人經(jīng)常遭受脾胃功能或胃腸功能的不適，所以多飲酒對身體有好處，但也有好處和壞處。應(yīng)該注意的是，不能空...
一頭烏黑亮麗的頭發(fā)對你的形象真的很有好處，但是如果頭發(fā)上有白色的頭皮屑，那就太不愉快了。因此，有頭皮屑問題的朋友們在嘗試了許多無效的方法后，對去屑失去了信心。酮康唑香波對去屑有極好的效果。...
許多人腳上長了雞眼。玉米的成因是多方面的，也是復(fù)雜的。當(dāng)他們患了雞眼，他們會對病人的生活產(chǎn)生很大的影響。如果你覺得你有雞眼，你應(yīng)該及時去看醫(yī)生治療。當(dāng)然，許多人認(rèn)為玉米只是一個小問題，可以用...
目前，人們長期受電腦輻射和多風(fēng)季節(jié)的影響。如果面部皮膚得不到適當(dāng)?shù)淖o(hù)理，就會出現(xiàn)一系列的現(xiàn)象，如面部發(fā)黃和變黑。如果現(xiàn)在不注意這些現(xiàn)象，將來會給你的面部皮膚帶來更壞的影響。因此，建議你先洗臉...
Pigu，一種保持健康和減肥的方法，現(xiàn)在非常流行。一般來說，不建議在庇古時期吃，但是如果你不能堅持吃，你也可以吃一些棗、南瓜、龍眼和其他水果和蔬菜。...
每個人都更關(guān)心自己的美麗，畢竟現(xiàn)在是一個看重美麗的時代。目前，大眼睛和小鼻子更受歡迎。然而，在生活中，有些人有更大的鼻子，這使得人們覺得面部特征不夠漂亮。在日常生活中，也有一些方法可以讓鼻子變...
眉毛上的垂直線主要是由過多的面部表情造成的，面部皮膚脫水也會導(dǎo)致眉毛上垂直線的增加。你可以選擇面部按摩來改善皺紋，使用維生素E或保濕面膜等。這樣可以保證臉部的濕度，但是你應(yīng)該注意工作和休...
硒是人體的生命之火，是人體內(nèi)不可缺少的營養(yǎng)成分，生活中很多水果都含有硒元素，但你知道含硒第一名的水果是什么嗎？含硒高的水果又有哪些呢？跟水簇養(yǎng)生網(wǎng)一起來看看吧。...
一級夫妻性生活的年紀(jì)大概在20歲到50歲左右，如果是一種比較好的情況下，性生活的頻率一般在10到20分鐘左右，如果是比較差的夫妻，性生活的頻率可能會受到很多因素的影響，有些人可能會擔(dān)心，性生活的質(zhì)量不...
黃ba等中草藥可用于治療多種男科疾病。 可是不應(yīng)過多使用。 畢竟，該藥具有三點毒性，并且肯定會引起身體某些副作用，尤其是對腎功能的影響，將產(chǎn)生非常大的影響，因此一定應(yīng)該引起注意， 可能會繼續(xù)導(dǎo)致自...
三道鱗魚是歐美鯽魚的一種變異魚，它在人體表面的鱗片很大。所以在歐洲的一些地區(qū)，經(jīng)常有人用三道鱗魚來曬蝦米作為鏡子，所以三道鱗魚也有另外一個名字，鏡魚。如今，三道鱗魚已經(jīng)被引入中國許多地區(qū)進(jìn)行...
在我們的日常生活中，桂花酒屬于一種常見的酒，具有桂花樹的香味和多種營養(yǎng)元素，特別適合冬季飲用。桂花酒可以暖身祛寒作用，還可以合理減少疲勞功效，改善睡眠質(zhì)量等。...
許多人喜歡在冬天去釣魚。在這種情況下，米酒通常被用作巢的材料。對于一些更有經(jīng)驗的人來說，筑巢是非常好的。然而，許多人沒有做好并死去。死亡巢穴的出現(xiàn)有很多原因。可能是制作巢料時香料的味道太...
三角肌 注射是預(yù)防接種醫(yī)院門診的重點工作。精確定位和選擇合適的位置對于確保安全注射非常重要。三角肌注射/的正確方式是什么？三角肌宜注射方法是將右手收緊在部分皮膚上，將無名指固定在針上，使針...
我堅信很多人都吃過馬鮫魚，這是一種有價值的魚，營養(yǎng)含量很高，比如蛋白質(zhì)豐富多彩。另外，馬鮫魚含有維生素A和各種礦物質(zhì)元素。據(jù)了解，食用馬鮫魚具有補(bǔ)氣養(yǎng)血的功效，還具有止咳化痰的功效。女性可以通...
夏天很多人喜歡買泥鰍吃。泥鰍有很多做法，比如蒸、炸等等。它是一種人們非常喜歡吃的食物。而且泥鰍的營養(yǎng)價值也很高，但是每次吃的時候處理掉泥鰍是個麻煩的問題，尤其是如果內(nèi)臟需要清理的話。所以...
相信很多人都用過上海藥皂，它是中國上海第一塊特效除菌皂，那么上海藥皂都有什么作用呢？下面就來說說上海藥皂的功效與作用，一起來了解下吧。...
